연구 미엘로페록시다스 염색 은 혈액 질환 진단 을 향상 시킨다

백혈구 과산화효소(POX) 염색이라고도 알려진 미엘로과산화효소(MPO) 염색은 널리 사용되는 세포화학 염색 방법입니다. 주로 골수 세포 및 혈액 도말 염색에 사용되는 이 기술은 혈액 질환, 특히 백혈병 분류를 진단하는 데 도움을 주기 위해 세포 내 과산화효소 활성을 감지합니다.

MPO 염색은 세포 내 과산화효소의 촉매 반응에 의존합니다. 이 효소는 산화물을 분해하여 산소를 생성하고, 이 산소는 요오드화칼륨과 반응하여 요오드를 형성합니다. 요오드는 Wright-Giemsa 염료와 결합하여 현미경으로 과산화효소 분포를 보여주는 색깔의 과립을 세포질에 생성합니다. 서로 다른 세포 유형은 과산화효소 함량과 분포 패턴이 다르므로 MPO 염색을 통해 이를 구별할 수 있습니다.

표준 MPO 염색에는 정확성과 신뢰성을 보장하기 위해 특수 시약 키트가 필요합니다. 일반적인 키트에는 다음이 포함됩니다.

• 용액 A: 에오신 용액 - 세포질을 빨간색 또는 분홍색으로 염색하는 산성 염료
• 용액 B: Azure II - 핵을 파란색 또는 보라색으로 염색하는 염기성 염료
• 용액 C: 요오드화칼륨 PBS 완충액 - 과산화효소 반응 기질을 포함하고 pH 안정성을 유지합니다.
• 용액 D: Wright-Giemsa 염색 - 세포 형태를 향상시키는 이중 목적 염색

키트는 다양한 실험실 요구 사항을 수용하기 위해 다양한 크기(5-테스트, 20-테스트 및 100-테스트 구성)로 제공됩니다.

1. 작업 용액 준비: 용액 C와 용액 D를 혼합합니다(일반적으로 1.0ml:250µl 비율). 2시간 이내에 사용하십시오.
2. 도말 고정: 준비된 골수 또는 혈액 도말을 메탄올 또는 에탄올로 5-10분 동안 고정합니다.
3. 염색: 고정된 도말을 작업 용액에 5-10분 동안 담그고 온도와 습도를 조절합니다.
4. 헹굼: 증류수 또는 PBS 완충액으로 부드럽게 씻어 과도한 염료를 제거합니다.
5. 대비 염색(선택 사항): 핵 대비를 향상시키기 위해 헤마톡실린을 사용합니다.
6. 건조: 자연 건조하거나 헤어 드라이어를 사용합니다.
7. 현미경 검사: 염색된 도말을 검사하여 과산화효소 활성 및 분포를 평가합니다.

결과 해석에는 전문적인 전문 지식이 필요합니다. 일반적인 결과는 다음과 같습니다.

• 양성 반응: 적갈색에서 짙은 파란색 세포질 과립(약한 대 강한 양성). 과립이 전체 세포질을 덮거나 핵을 가릴 수 있습니다.
• 음성 반응: 과립이 없는 파란색 세포질과 균일하게 자주색-빨간색 핵.
• 호산구: 강렬한 짙은 파란색 염색을 나타내며, 때로는 세포 외 바늘 모양의 결정이 나타납니다.

• 백혈병 분류: 골수성(MPO 양성) 백혈병과 림프성(MPO 음성) 백혈병을 구별하여 치료 결정을 안내합니다.
• 급성 골수성 백혈병(AML) 진단: 골수성 기원을 확인하고 아형을 돕고, 다양한 양성 반응률은 서로 다른 AML 아형을 나타냅니다.
• 골수형성이상 증후군(MDS) 평가: 세포 성숙 및 분화를 평가하며, 비정상적인 MPO 패턴은 MDS를 시사합니다.
• 기타 혈액 질환: 만성 골수성 백혈병 및 골수 섬유증을 진단하는 데 유용합니다.

• 시약 품질 및 보관 조건
• 엄격한 프로토콜 준수
• 적절한 도말 준비
• 최적의 염색 시간
• 병리학자의 전문적인 현미경 검사

기술 발전은 MPO 염색을 계속 향상시키고 있습니다. 면역조직화학은 이제 더 정확성을 위해 MPO와 면역 표지를 결합하고, 유세포 분석은 정량적 MPO 감지를 가능하게 합니다. 이 고전적인 세포화학 방법이 발전함에 따라 혈액학적 진단 및 치료에 더욱 크게 기여할 것으로 기대됩니다.